Técnicas de Edición Genómica en Cáncer Gástrico

A pesar de las recientes mejoras en los tratamientos comunes, la tasa de supervivencia a 5 años para los pacientes con cáncer gástrico es solo 45%. Por lo tanto, el desarrollo de nuevos enfoques terapéuticos para el cáncer gástrico, como la terapia génica, se necesita con urgencia.

p53 es conocida como la "guardia genoma" y desempeña papeles importantes en varios procesos celulares, incluyendo la regulación del ciclo celular, reparación del daño en el ADN y la apoptosis. Las mutaciones genéticas en p53 están presentes en> 50% de los tejidos tumorales humanos, y es la mutación genética más comúnmente detectado en el cáncer.

Por lo tanto, una estrategia de terapia génica se ha desarrollado que emplea RAD-p53, un adenovirus debilitado que lleva la de tipo salvaje p53 gen. RAD-p53 se ha demostrado que inhibe el crecimiento del tumor, promover la apoptosis mediante la inducción de la expresión de Puma, Bax, Bak y Fas, y para sensibilizar a las células tumorales a la radioterapia y la quimioterapia.

Referencia Bibliográfica:

1.Decreased expression of long noncoding RNA GAS5 indicates a poor prognosis and promotes cell proliferation in gastric cancer [Acceso 23 Diciembre 2016] Disponible en:https://bmccancer.biomedcentral.com/articles/10.1186/1471-2407-14-319

2CXC chemokines and chemokine receptors in gastric cancer: From basic findings towards therapeutic targeting.[Acceso 23 Diciembre 2016] Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3930968/

3.  Biomarkers for gastric cancer: prognostic, predictive or targets of therapy? [Acceso 23 Diciembre 2016] Disponible en: https://link.springer.com/article/10.1007/s00428-013-1533-y

Terapia con Stem Cells en Cáncer Gástrico

 El cáncer gástrico asociado al Helicobacter pylori se originaba en células madre provenientes de la médula ósea: con la nueva teoría, tales células madre no serían otras que células epiteliales reprogramadas in situ. En cuanto a la causa en sí del cáncer, el rompecabezas continúa armándose poco a poco, pero siguen faltando piezas. Se puede postular entonces que el fibroblasto, la célula epitelia, se reprogramarían a célula madre pluripotente como primer paso hacia su transformación neoplásica.

Específicamente, son capaces de dar lugar a más copias de sí mismos (auto-renovación) y dar lugar a todos los tipos de células encontradas en el cáncer (diferenciación). Por lo tanto, las CSC son tumorigénicas (formadoras de tumores), tal vez en contraste con otras células de cáncer no tumorigénicas. CSC puede generar tumores a través de los procesos de células madre de la auto-renovación y la diferenciación en múltiples tipos de células. Se propone que tales células persistan en tumores como una población distinta y causen recaída y metástasis dando lugar a nuevos tumores. Por lo tanto, el desarrollo de terapias específicas dirigidas a CSC tiene esperanza para la mejora de la supervivencia y la calidad de vida de los pacientes con cáncer, especialmente para los pacientes con enfermedad metastásica.

Referencia Bibliográfica:

1. Gastric cancer stem cells in gastric carcinogenesis, progression, prevention and treatment [Acceso 16 Diciembre 2016] Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4017057/

2. Roles of Wnt/β-catenin signaling in the gastric cancer stem cells proliferation and salinomycin treatment [Acceso 16 Diciembre 2016] Disponible en: https://www.nature.com/articles/cddis2013515

3.  CD44v8-10 Is a Cancer-Specific Marker for Gastric Cancer Stem Cells [Acceso 16 Diciembre 2016] Disponible en: http://cancerres.aacrjournals.org/content/74/9/2630.short

ADN recombinante en la naturaleza y ADN recombinante artificial en Cáncer Gástrico

DNA Recombinante en la naturaleza (plásmidos)

El DAN se recombina de forma natural mediante procesos como la reproducción sexual, la transformación bacteriana y la infección viral.  En el caso de las bacterias, como el Helicobacter pylori la transformación le permite capturar DAN libre que puede ser parte del cromosoma de otra bacteria, incluso de otra especie bacteriana; también puede haber transformación cuando capturan diminutas moléculas de DAN llamadas plásmidos, los cuales le permiten a las bacterias crecer en ambientes nuevos; un claro ejemplo de esto lo encontramos en las bacterias que tienen plásmidos resistentes a antibióticos. 

DNA Recombinante Artificial

La tecnología del ADN recombinante, se basa en incorporar el gen humano de una proteína conocida, a través de una molécula de ADN artificial formada in vitro, a una célula hospedera. Se usa básicamente para la obtención de anticuerpos monoclonales. Las citoquinas más usadas como tratamiento directo del cáncer son:

-El Interferón alfa: son producidas por distintas células e incluyen un rango amplio de actividades biológicas, como son: la inducción de resistencia celular a virus, regulación de la función inmune, regulación del crecimiento y diferenciación de muchos tipos celulares.

-La Interleuquina 2: induce la actividad biológica a través de un receptor específico de membrana, el cual se encuentra frecuentemente expresado en las células inmunes, ya que juega un rol central en la respuesta inmune, como consecuencia de la activación antigénica.

Esto ha permitido el desarrollo de anticuerpos quiméricos (chAb), anticuerpos humanizados (hzAb), y más recientemente, anticuerpos monoclonales completamente humanos o fully human (fhAb).

Referencias Bibliográficas:

1. Terapia génica para el tratamiento del cáncer. [Accessed 08 December 2017] Available: http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=S0123-90152014000100005&script=sci_arttext&tlng=es

2.Antígenos asociados a tumores y su potencial uso en el tratamiento del cáncer [Accessed 08 December 2017] Available: http://rcientificas.uninorte.edu.co/index.php/salud/article/viewArticle/5981

Una prueba molecular diferente de PCR para Cáncer Gástrico

Tema: Identificación de biomarcadores sanguíneos para la detección de lesiones premalignas y el diagnóstico del cáncer gástrico


Objetivo: El objetivo de este trabajo es identificar marcadores moleculares (perfil de expresión de ARNm) que distingan a los pacientes con condiciones premalignas (atrofia, metaplasia) y cáncer gástrico, de aquellos pacientes que solo tienen gastritis.


Metodología: El procesamiento de la muestra implica el aislamiento de ARN total usando modificaciones de los procedimientos estándar que involucran extracción y purificación orgánica. La calidad y cantidad del ARN total se evaluó por espectrofotometría y el equipo Agilent Bioanalyzer. Las muestras de ARN total se amplificaron y se prepararon para la hibridación de microarrays utilizando una reacción de trascripción in vitro con nucleótido marcado.La calidad y cantidad del ARN complementario resultante (ARNc) también se evaluó mediante espectrofotometría y el equipo Agilent Bioanalyzer antes de la hibridación. El ARNc se hibridó con sondas de ADN en SurePrint G3 Human Gene Expression 8x60K v2 Microarrays de Agilent Technologies. El estudio se realizó con la última versión de microarrays de todo el genoma humano, la cual se dirige a 50 599 características biológicas diferentes. Después de la hibridación, las matrices se lavaron y se escanearon en alta resolución en el escáner Agilent Microarray SureScan con rango dinámico ampliado.Finalmente, las imágenes del microarray se inspeccionaron visualmente y se obtuvieron los datos utilizando el software Agilent Feature Extraction, que genera métricas de control de calidad para cada punto en la matriz. 

Conclusiones:Este estudio permite identificar nuevos biomarcadores a través de la expresión genética del ARN mensajero, el cual diferencia en sangre las etapas de la cascada de Correa, y permite diagnosticar el cáncer gástrico. Es probable que en un futuro se puedan utilizar como una prueba diagnóstica o de seguimiento.

Referencias Bibliográficas:

1. Identification of Blood Biomarkers for Detecting Premalignant Lesions and Gastric Cancer. [Accessed 02 December 2017] Available: http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-99572017000100002

2. Epigenetics in the pathogenesis and early detection of gastric cancer. [Accessed 01 December 2017] Available: http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0034-98872013001200011&script=sci_arttext

Prueba de PCR para Cáncer Gástrico

Tema: Evaluación de diferentes pruebas para el diagnóstico de Helicobacter pylori.

Objetivo: Determinar índice de desempeño, sensibilidad, especificidad y valores de cuatro métodos invasivos del Helycobacter pylori.

Tipo de Muestra Biológica: Biopsia de mucosa gástrica.

Tipo de Ácido Nucleico a ser extraído: ADN genómico bacteriano 

Método Físico: Congelación a -20oC 

Método Químico: Amortiguador Tris-HCl 50 mM,pH7.2; EDTA 1mM con SDS al 1% y 100 µg de proteinasa K/ml.

Gen o secuencia a amplificar: gen ureC.

PCR: Stándar, 35 ciclos.

Visualización: EFO

Referencias Bibliográficas:

1. DETECCIÓN DE HELICOBACTER PYLORI POR PCR DEL GEN 16S EN BIOPSIAS GÁSTRICAS COLECTADAS EN LA CIUDAD DE BOGOTÁ: ESTUDIO PRELIMINAR  [Accessed 25 November 2017] Available from:https://revistamedicina.net/ojsanm/index.php/Medicina/article/view/110-2

2.  Prevalencia de Helicobacter pylori y características histopatológicas en biopsias gástricas de pacientes con síntomas dispépticos en un centro de referencia de Medellín [Accessed 25 November 2017] Available from: http://www.redalyc.org/html/3377/337745613002/

Pruebas de Tamizaje y de Confirmación en el Cáncer Gástrico

La importancia del tamizaje radica en que mediante la detección temprana de la enfermedad se ha logrado reducir en un 40 a 60% la mortalidad de cáncer gástrico.Pruebas de Tamizaje-Test de pepsinógeno sérico I y II-La fotofluorografía con un nivel de evidencia 1++-Endoscopia (Nivel de evidencia 2)-Anticuerpos para H. pylori (Nivel de evidencia 2)-El principal examen que se debe realizar es una endoscopía y una biopsia estomacal.-Gastrina-17: en pacientes con cáncer gástrico existen cantidades elevadas de gastrina-17.-Marcador tumoral CA19-9: es una glicoproteína que en concentraciones mayores de 37UL/ml puede determinar la presencia de cáncer gástrico (62%).Pruebas ConfirmatoriasEl principal examen que se debe realizar para confirmar o descartar un cáncer de estómago es la endoscopia superior, procedimiento utilizado para estudiar el interior, a fin de verificar si existen zonas anormales.

Referencias Bibliográficas:1. Scielo.org. Tamización de cáncer gástrico. [Accessed 18 November 2017] Available from: http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-995720100001000042Diferenciación de cáncer gástrico temprano vs linitis plástica; ¿los síntomas hacen la diferencia?.. [Accessed 18 November 2017] Available from: http://actamedicacolombiana.com/ojs/index.php/actamed/article/view/598 

3.Guía de práctica clínica para la prevención,

diagnóstico y tratamiento del cáncer gástrico

temprano . [Accessed 18 November 2017] Available from: http://gastrocol.com/file/Revista/v30s1a05.pdf
- Imagen tomada de: http://www.endoscopy-colon-explorer.com/wp-content/uploads/2014/05/Fig-12B.jpg

Alteraciones de la Epigenómica del Cáncer Gástrico

La epigenética estudia los cambios reversibles y heredables en el genoma de un individuo que afecta a las secuencias de ADN no codificantes de proteínas. Estos cambios terminan expresando modificaciones a nivel del epigenotipo. Los principales mecanismos de la epigenética son:

Para el cáncer de estómago encontramos alteraciones en la metilación de ADN donde se inactivan genes supresores de tumores como genes de reparación hMLH1 y hMSH2 lo que conduce a mutaciones en secuencias repetitivas dentro de genes críticos para el proceso neoplásico.  En la metilación se adiciona de forma covalente un grupo metilo de la S-adenosilmetionina (SAM) en el carbono 5 del anillo de citosina formando así, la base 5-metilcitosina (5mC) o "quinta base".

-Las modificaciones de histonas y cromatina. 
-Los micro ARNs. 

Referencias Bibliográficas:

1. Scielo.cl. Bases epigenéticas del cáncer gástrico. [Accessed 12 November 2017] Available: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-98872013001200011

2. Impactjournals.com. Análisis Epigenómicos Integrados de potneiar, así coomo regiones promotoras en el cáncer gástrica. [Accessed 11 November 2017] Available: http://www.impactjournals.com/oncotarget/index.php?journal=oncotarget&page=article&op=view&path[]=8239&pubmed-linkout=1